Nejat İşler, 28 Şubat 1972 senesinde İstanbul’un Eyüp semtinde dünyaya geldi. Feshane işçilerinden birinin torunu olan Nejat İşler, ilkoludan sonra Cağaloğlu Anadolu Lisesi’nde sürdü. Ortamına alışamadığı yeni okulunda popüler olmak ve derslerinden kaçmak için okulun tiyatro koluna girdi. Kısa zamanda popüler olan Nejat İşler derslerini de boşluyordu. Liseyi bitirdikten sonra üniversiteye giremeyince, para kazanmak için çay partileri düzenlemeye başladı.
Nejat’ın işleri umduğu gibi gitmeyince borca girdi. Borçlarını kapatabilmek için Mahmutpaşa’dan t-shirt alıp Teşvikiye’de bu t-shirtleri satma kararı aldı. Kış aylarında ise t-shirt yerine kitap, dergi ve plak sattı.
İki sene sonra Yıldız Teknik Üniversitesi Fotoğraf bölümünü kazanan Nejat İşler iki yıllık olan bölümden askerlik için iyi olmadığını düşünerek vazgeçti.
On yıl kadar satış işleriyle uğraştıktan sonra Taksim’de dolaştığı (27 Mart Dünta Tiyatrolar Günü) bir gün, bir tiyatro sahnesinde bedava gösterimde olan “Danton’un Ölümü” adlı eseri seyretti. “Ben niye bu işi yapmıyorum?” diye düşünen Nejat İşler, dayısının yanına gittiği Eskişehir’de konservatuar sınavına gitmeye karar verdi ve kazandı. İstanbul’a döndüğünde, ilanını gördüğü Mimar Sinan Üniversitesi Konservatuar Bölümüne başladı. 1995 senesinde Mimar Sinan Üniversitesinin devlet konservatuar bölümünden mezun olana kadar devlet tiyatrosunda ve televizyon dizilerinde rol aldı.
1995 senesinde mezun olduktan sonra iki arkadaşıyla birlikte “Kahramanlar ve Soytarılar Tiyatrosu”nu kurdu. Tiyatronun kurulmasından sonra kendi oyunları için hikayeler yazmaya başladı. “Belki hiç okumayan bir diğeride yazabilir bunları, benim yazı yazmamın nedeni yazmak değil, yalnızca oynayalım diye yazıyorum.” dediği, “Tuhaf Şehir Hikayeleri”, “Biz Zavallı Erkekler” ve “Yalnızlık Benim Gizli Sevgilim”adlı üç kitap yazdı.
41.Antalya Altın Portakal Ödülleri için Erkek Oyuncu dalında aday olarak gösterildi. Her fırsatta amacının başrol oynayıp şöhret olmak olmadığını söyleyen İşler, tek arzusunun yaptığı işi elinden geldiğinin en iyisi olarak yapmak olduğunu, tiyatro yaparken ölmek istediğini kelimelerine ekledi.
1994 senesinde oynadığı ilk televizyon dizisi olan Gurur’dan sonra; Şehnaz Tango, Nasıl Evde Kaldım, Dedem, Gofret ve Ben,Aşk ve Gurur, Şeytan Ayrıntıda Gizlidir dizilerinde oynadı. 1999’da ilk sinema filmi Eylül Fırtınası’nda rol aldı. Çağan Irmak’ın Mustafa Hakkında Herşey filmi ile sinema oyunculuğuna sürdü.
2011 senesinde Erdal Beşikçioğlu’nun başrolde oynadığı Behzat Ç. Bir Ankara Polisiyesi dizisinde oynadığı sıradışı bir seri katil olan Ercüment Çözer rolünü canlandırdı.
Duman grubunun “Ah” parçasını coverlamıştır. Bunun bunun yanında Suzan Kardeş’in Haluk Bilginer, Olgun Şimşek, Cem Yılmaz, Özgü Namal gibi isimlerin olduğu Suzan Kardeş & Makyaj Odası Şarkıları adlı albümünde yer almış ve Hancı adlı şarkıyı seslendirmiştir.
2013 senesinin Eylül ayında Beren Saat ile birlikte oynadığı İntikam adlı diziden sedef hastalığı sebebiyle ayrılarak Bodrum’a giden Nejat İşler’in düzensiz bir yaşantısı olduğu ve günde 2 saat uyuduğu iddia edilmeye başlanmıştı. Daha sonraki zamanlarda siroz hastası olduğu haberleri yaşanan Nejat İşler için tedavi olmak istemediği yönünde açıklamalar yapılıyordu. Bu zamanlarda facebook sayfasında kendisini ifade eden bir açıklama yapmıştır.
17 Ocak 2014 tarihinde hastaneye kaldırılarak yoğun bakım ünitesinde tedavi altına alındı. 22 Ocak 2014 tarihinde tedavi gördüğü Bodrum’daki hastaneden İstanbul’daki Acıbadem Maslak Hastanesi’ne nakledilmiştir.
30 Ocak 2014 tarihinde doktorlar Nejat İşler’in konuşmaya başladığı açıkladı.
2013 İntikam – Rüzgar
2013 Kış Uykusu
2013 Behzat Ç. Ankara Yanıyor – Ercümen Çözer
2011 Sessiz Olmaz
2010 Çınar Ağacı Yağız
2010-2012 Behzat Ç. Bir Ankara Polisiyesi – Ercüment Çözer
2010 Kaybedenler Kulübü – Kaan Çaydamlı
2009 Ejder Kapanı – Ensar
2009 Siyah Beyaz – Doktor
2009 Kapalı Çarşı – Cemil
2009 Parmaklıklar Ardında
2009 11’e 10 kala Ali
2007 Bıçak Sırtı
2007 Yumurta – Yusuf
2007 Yaşamın Kıyısında Komiser – Konuk oyuncu
2006 Barda – Selim
2005 2 Süper Film Birden – Refik Bey
2005 Beyaz Gelincik
2005 Çalıntı Gözler – Halil
2004 Çemberimde Gül Oya
2004 Şeytan Ayrıntıda Gizlidir
2004 Mustafa Hakkında Herşey – Fikret
2004 Anlat İstanbul – Ramazan
2004 Aliye
2003 Kurşuın Yarası
2003 Sultan Makamı
2002 Gülbeyaz Kadir
2002 Aşk ve Gurur
2001 Dedem, Gofret ve Ben
2001 Nasıl Evde Kaldım
1999 Deli Yürek – Oktay
1999 Eylül Fırtınası – Büyük Metin
1994 Şehnaz Tango – Ergün
1994 Gurur